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颗粒细胞剥离液配方——让细胞实验更加高效

来源:www.xiashangjiaoyu.com 时间:2024-05-14 18:17:48 作者:美味配方网 浏览: [手机版]

  细胞实验命科学中不可或缺的一部分,颗粒细胞剥离液细胞实验中常用的试剂之一原文www.xiashangjiaoyu.com。颗粒细胞剥离液可以帮助实验者快速地将细胞从培养皿或组织中分离出来,从进行后续的实验操。本文将介绍颗粒细胞剥离液的配方及制备方法,帮助实验者更加高效地进行细胞实验。

颗粒细胞剥离液配方——让细胞实验更加高效(1)

一、颗粒细胞剥离液的配方

颗粒细胞剥离液的配方可以根据实验的需要进行调整,以下一种常用的配方:

  1. 10x PBS(1L)

  NaCl 80g

  KCl 2g

  Na2HPO4 14.4g

  KH2PO4 2.4g

  蒸馏水 1L

  2. 2x trypsin-EDTA(100mL)

  Trypsin 2.5g

EDTA 1g

  PBS 100mL

  3. 1x trypsin-EDTA(100mL)

  2x trypsin-EDTA 50mL

  蒸馏水 50mL

4. 1x颗粒细胞剥离液(100mL)

1x trypsin-EDTA 50mL

  FBS 10mL

DNase I 50μL

颗粒细胞剥离液配方——让细胞实验更加高效(2)

二、颗粒细胞剥离液的制备方法

1. 制备10x PBS溶液

  将80g NaCl、2g KCl、14.4g Na2HPO4、2.4g KH2PO4加入1L蒸馏水中,搅拌至完全溶解,调节pH至7.4,最后用蒸馏水补足至1L美 味 配 方 网

  2. 制备2x trypsin-EDTA溶液

  将2.5g trypsin、1g EDTA加入100mL PBS中,搅拌至完全溶解,调节pH至7.4,最后用PBS补足至100mL。

  3. 制备1x trypsin-EDTA溶液

  将50mL 2x trypsin-EDTA溶液和50mL蒸馏水混合均匀。

  4. 制备1x颗粒细胞剥离液

  将50mL 1x trypsin-EDTA溶液、10mL FBS和50μL DNase I混合均匀,即可得1x颗粒细胞剥离液美味配方网www.xiashangjiaoyu.com

三、颗粒细胞剥离液的使用方法

  1. 将培养皿中的细胞用PBS洗涤一,将PBS倒

  2. 加入适量的颗粒细胞剥离液,轻轻摇晃培养皿,使颗粒细胞剥离液均匀地覆盖在细胞上。

3. 放置培养皿在37℃的孵化箱中,等待细胞与颗粒细胞剥离液充分反应,通常需要5-10分钟美 味 配 方 网

4. 在显微镜下观察细胞的状态,当细胞出现明显的离散现象时,即可停止反应。

  5. 加入足够的培养基,将细胞转移至新的培养皿中。

四、注意

1. 颗粒细胞剥离液中的DNase I可以避细胞在分离过程中发DNA断裂的粘附现象xiashangjiaoyu.com

  2. 在使用颗粒细胞剥离液时,应根据实验需要调整浓度和反应时间。

  3. 颗粒细胞剥离液中的trypsin和EDTA均为白酶,应避接触皮肤和眼睛,如不慎接触,应立即用大量水冲洗。

  4. 制备颗粒细胞剥离液时,应注意各种试剂的质量和纯度,以影响实验结果来源www.xiashangjiaoyu.com

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